溶菌酶的溶菌效果ppt

  第三次试验 Ⅰ溶菌酶的溶菌效果 Ⅱ小吞噬试验 溶菌酶的溶菌效果 试验原理 溶菌酶（lysozyme）又称胞壁质酶（muramidase）或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶（N-acetylmuramide glycanohydrlase），是正常体液与排泄液中所含的一种小分子碱性蛋白质。它能水解革兰阳性菌细胞壁中的肽聚糖成分(效果于β-1，4糖苷键），使细胞壁崩解。溶菌酶还可与带负电荷的病毒蛋白直接结合，与DNA、RNA、脱辅基蛋白构成复盐，使病毒失活。因而，该酶具有抗菌、消炎、抗病毒等效果。对错特异性免疫中一种重要的体液物质。 试验资料与器件 1、人的唾液（含有溶菌酶）、溶菌酶规范品、生理盐水。 2、细球菌（M.Lysodeikticus)。 3、1.0%盐水琼脂管（7-8mL/管）、灭菌的1mL吸管、毛细吸管、打孔器、平皿、竹签和橡皮等。  注：①唾液 ②生理盐水（阴性对照） ③溶菌酶（阳性对照）  试验过程： 1、取灭菌的小平皿一个，用灭菌1mL的吸管汲取0.5mL(9亿/mL）细球菌活菌菌液注入平皿内。 2、取已溶化并冷却至45℃-55℃的生理盐水琼脂管一支，倾泻于上述平皿内，敏捷水平混匀，平放待凝。 3、用打孔器（孔径为6mm）打孔，用竹签挑出孔中琼脂。 4、先用清水漱口，略待顷刻将唾液吐于灭菌平皿内，用毛细吸管吸出（留意别有气泡，不要溢出），并别离参加生理盐水和溶菌酶规范品。置37℃，18h后调查成果。 猜测试验成果 阳性成果：加在唾液空周围呈现一圈很明显的溶菌环。 需求留意的几点 在试验中需求留意无菌操作，不然杂菌成长会影响溶菌环的调查 小吞噬试验 试验原理 机体内具有吞噬功用的细胞可分为两大类，即小吞噬细胞和大吞噬细胞。小吞噬细胞一般指血液中的中性粒细胞。 中性粒细胞（neutrophilicgranulocyte）在瑞氏染色血涂片中，胞质呈无色或极浅的淡红色，有许多弥散散布的细微的（0.2～0.4微米）浅红或浅紫色的特有颗粒。细胞核呈杆状或2～5分叶状，叶与叶间有细丝相连。其颗粒外表有一层膜包裹，颗粒中含髓过氧化物酶、酸性磷酸酶、吞噬素、溶菌酶、β葡糖苷酸酶、碱性磷酸酶等。中性粒细胞具趋化效果、吞噬效果和杀菌效果。 试验资料与器件： 1、外表葡萄球菌菌液（9亿/mL）。 2、3.8%枸櫞酸钠或肝素（25U/mL）。 3、毛细吸管、凹玻片、载玻片、牙签、甲醇、瑞氏-姬娒萨染料、PH6.4PB、酒精、棉球、采血针等。 试验过程： 1、取厚凹玻片一张，在凹孔中滴加一滴（0.4mL）3.8%枸櫞酸钠或肝素（25U/mL）。 2、酒精棉球消毒手指后，用采血针从消毒部位采纳2大滴（约0.2mL）参加凹孔中混匀。 3、加表皮葡萄球菌菌液1 滴（0.02-0.04mL），然后用牙签悄悄搅匀。 4、将玻片放湿盒内，置37℃孵箱中40-50min。 5、效果结束，取出1滴制成薄片，天然枯燥。 6、置瑞氏液1min，置PH6.4PB中3min，置瑞氏-姬娒萨染料染5-10min，蒸馏水洗，待干镜检。 猜测试验成果 胞浆呈淡蓝色或淡红色，细菌呈深蓝色或紫色，红细胞呈褐色，细胞核呈紫红色。 需求留意的几点 1、个体差异、年纪、健康情况的不同，其吞噬才能亦不同。 2、涂血片时不宜太厚，不然不宜调查。 胞质呈无色或极浅的淡红色，有许多弥散散布的细微的（0.2～0.4微米）浅红或浅紫色的特有颗粒。细胞核呈杆状或2～5分叶状，叶与叶间有细丝相连。 油镜下见中性粒细胞胞浆呈淡兰色，核分叶、紫红深染，葡萄球菌呈兰色。可见中性粒细胞胞浆内吞噬有许多白葡菌。 * * * * 2 3 1 成果 回来 回来 *

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