微生物的保存办法许多,依据不同的微生物菌(毒)株或不同的试验要求,可选用不同的保存办法,成本常见的有斜面保存法,穿刺保存法、液体白腊保藏法、沙土管保存法、冷冻保存法、真空冷冻枯燥保存法。成本真空冷冻枯燥保存法便利复生、保存期长,运送和保存便利,活菌率高。所以近几年真空冷冻枯燥被大范围的使用在菌种保存范畴。
菌种冻干机是一款专关于菌种保存而规划的冻干机。使用安剖管架预冻好的样品直接搬运摆放到冻干仓隔板上即可,容量大,操作简略快捷。316L医用级不锈钢资料质地方形冻干仓,隔热保温作用好,真空性能好,有很大成效避免样品因枯燥进程中升温过快而发生样品外形陷落,活性降低一级问题。是研讨菌种保存客户的抱负挑选。
冷冻枯燥是将菌体县浮液冷冻到冰点以下,然后转变为固体结晶态,然后在低温低压(直空)下使固体提高而脱水的枯燥办法,一般于燥处理进程会损坏微生物的细胞膜,引起细胞的很多逝世,
因而需求增加保护剂,能够使菌液密度均一,削减活菌在冻干进程中的机械效应和溶质效应带来的逝世。因而,在冻干前参加的保护剂配方就成为了至关重要的决议性要素,它既会影响到储存期细胞的活性以及稳定性,也会影响到复水时细胞存活率。
冻于法是长时刻保存细菌,酵母、真菌,病毒和立克次氏体的规范办法(在冻干前一般要加冷冻保护剂,这样可使细胞革除在冷冻初期因构成冰晶而形成的危害。ATCC惯例用10%脱脂奶或12%
蔗糖作为冷冻保护剂,而美国农业部(USDA)的农业研讨服务机构的试验人员用牛或马血清作为微生物的冷冻保护剂(。在菌液中参加甘油和二甲亚砜(DMSO)也可避免冷冻中微生物的逝世,但实在的操作中应依据不同微生物决议使用或不必保护剂。
1、微生物培育,培育取得强健的菌种扩培液体。培育时依据菌种选不一样的培育基。培育到对数期取得很多强健的菌种,确保菌体浓度,一般到达109的浓度.
2、离心搜集菌体。经过离心法从液体培育基中取得菌体。如果是固体培育基能够直接搜集菌落,用保护剂溶解混匀。
3、将菌体、脱脂奶粉、海藻糖、蔗糖等保护剂在无菌水中混匀得到含有保护剂的菌体混悬液。
4、分装。将菌体混悬液在无菌环境平分装到无菌容器中,能够是安瓿瓶、西林瓶、EP、培育皿等。
5、预冻,预冻是最重要的。预冻欠好,菌领会逝世。要快速预冻,避免发生大冰晶形成细胞逝世。预冻要冻健壮,确保预冻充沛。
6、将预冻好的菌体,放入真空冷冻枯燥设备中进行冻干。如果是设备带预冻功用,也能够直接在冻干机上进行预冻。真空冷冻枯燥时刻和冻干曲线的规划要依据菌种的不同和菌体混悬液的浓度等进行规划。冻于好后真空密封保存。
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